Alaabta

Falanqaynta dhacdooyinka fosforyaalka borotiinka-ballaaran ayaa weli ah caqabad weyn oo lafo-gureedka sababtoo ah kakanaanta ballaaran ee shabakadaha fosforyaalka borotiinka.Shaqadan, waxaan ku qiimeyneynaa dhameystirka Lys-N, Lys-C, iyo trypsin iyadoo la eegayo awooddooda inay gacan ka geystaan ​​falanqaynta caalamiga ah ee fosfooraska.Nooc la safeeyey oo ah beddelka pH hoose ee xoogga leh ayaa loo adeegsaday si wax ku ool ah loo kala saaro N-terminally acetylated, fosforylated, iyo peptides-ka aan la beddelin.Wadarta 5036 fosphopeptides-ka aan-dareenka ahayn ayaa lagu aqoonsan karaa heerka daahfurka beenta ah ee <1% laga bilaabo 1 mg ee borotiinka iyadoo la adeegsanayo isku-darka saddexda enzymes.Xogtayadu waxay daaha ka qaaday in isku-xidhka u dhexeeya xogta fosfopeptide ee ka samaysan borotiinno kala duwan uu ahaa mid yar, halka isku-xidhka u dhexeeya laba xog isku mid ah oo isku mid ah ayaa la ogaaday inuu ka sarreeyo ugu yaraan 4 jeer.Sidan, isticmaalka isku midka ah ee Lys-N iyo trypsin waxay awood u siiyeen 72% korodhka tirada fosphopeptides ee la ogaaday marka loo eego d iyo trypsin kaligiis, halka tijaabinta isku dhafka ah ee trypsin ay keentay kaliya 25%.Haddaba, markii aan diiradda saarnay kaliya xogta trypsin-ka iyo Lys-N, waxaan aqoonsannay 4671 fosphopeptides oo aan caadi ahayn.Falanqaynta dheeraadka ah ee goobaha la ogaaday ayaa muujisay in xogta Lys-N iyo trypsin ay ku hodmeen qaabab kala duwan oo phosphorylation ah, taas oo caddaynaysa in hababka borotiinka badani ay aad u qiimo badan yihiin falanqaynta fosfooraska.